Practica: Indices Eritrocitarios

Indices Eritrocitarios 

Propósito:

Para realizar esta practica es necesario obtener primero los valores de el conteo de eritrocitos, hemoglobina y hematocrito presentes en la sangre.

Materiales:

En este caso  se ocuparan todos los materiales necesarios que anteriormente se ocuparon para cada una de las practicas ya realizadas

Nota:

En esta practica solo se harán operaciones con los resultados obtenidos del Conteo de Eritrocitos, Hemoglobina y Hematocrito.

Formulas:

Valor Hematocrito% X 10

_____________________= V.C.C En M 3

N°  Eritrocitos / L               Valores Normales 

                                           82.92 M 3

Sustitución

44.3% X 10

___________= 9.4658 X10-5 

4,680,000 

Hemoglobina g/dl X 10

__________________= H.C.M en pg

N° de Eritrocitos / L      Valores Normales 

                                          29-32 pg

Sustitución

15.3 g/d X 10

___________= 3.2692 X10-5 

4.680,000

Hemoglobina g/d X 10

_________________= C.H.C.M En %

Valor Hematocrito%     Valores Normales

                                         32- 36 %

Sustitución:

15.3 g/d X 10

___________= 3.4537 

44.3%

Hematocrito

HEMATOCRITO 

Introducción

El hematocrito es el volumen que ocupan los eritrocitos en una muestra sanguínea y se expresa en porcentaje.

La determinación de hematocrito es un método sencillo y confiable para detectar anemia o policitemia.

El hematocrito se puede determinar por dos métodos:

1.  Macrometodo (Wintrobe)
2. Micrometodo

Material:

• Tubo de wintrobe
• Tubo capilar 
• Plastilina
• Centrifuga
• Microcentrifuga
• Pipeta pasteur tallo largo
• Lector para hematocrito o regla

Técnica Macrometodo

1. Mezclar la muestra sanguinea suavemente y con una pipeta pasteur o canula llenar el tubo de wintrobe, colocando la punta de la pipeta hasta el fondo del tubo, la punta de la pipeta se va elevando pero permaneciendo por debajo del menisco de sangre para evitar la formación de burbujas o espuma. 

2.- El tubo se llena hasta la marca 100 con la muestra sanguinea y se ´pone a centrifugar durante 30 minutos a 3, 000 r.p.m.

3.- Se efectúa la lectura.

Técnica Micrometodo

Mezclar la muestra sanguínea adecuadamente y llenar un tubo capilar hasta 3/4 partes.

El extremo vació que no estuvo en contacto con la sangre se sella con plastilina o calor.



El tubo de la muestra sanguínea se coloca en la microcentrifuga a 10,000 r.p.m. durante 10 minutos.



Leer el porcentaje de hematocrito en el lector o medirlo con una regla.

Resultados:

Valores normales:

Hombres: 47.0  a 5.0

Mujeres: 42.0 a  5.0

Resultado Tubo de Wintrobe : 48 g/ dL
Resultado Tubo Capilar: 2.9 g/ dL

Hemoglobina

Hemoglobina 

Determinación cuantitativa de hemoglobina 

Principio del metodo

La hemoglobina es oxidada por la accion del ferriocianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en cianmetahemoglobina

la intensidad del color formado es proporcional a la concentracion de hemoglobina presente en la muestra.

Material

Sangre obtenida por punción venosa

Pipeta de thoma 

Tubos de ensaye 

Reactivos 

Estándar 

Blanco 

Dilución de la muestra 

Procedimiento:

1.- Aspirar con la pipeta de thoma de glóbulos blancos hasta la marca 0.5 

2.- Vertir la  sangre en el reactivo

3.- Colocar papel parafil  y mezclar 

4.- Meter la primer cubeta que es el el blanco para nivelar el espectofotometro debe estar nivelado a 100.

5.- En la segunda cubeta meter el estándar y hacer la lectura 

6.- En la tercer cubeta meter la muestra obtenida y realizar la lectura.

Obtener los cálculos necesarios y dar el resultado final. 

Cálculos:

( A ) Muestra
___________X 15 ( Conc. Patrón) = g/dL de hemoglobina en la muestra.

( A ) Patrón


 Valores de referencia:

Hombres: 14 - 18 g/ dl
Mujeres: 12 - 16 g/dl

Resultados:


Blanco= 100.0
Estándar = 0.340


Hombre
Muestra 1 = 0.392

__.392___x 15 = 17.29 g/dL
    .340


Mujer
Muestra 2 = 0.304

____.304____x 15 = 13.41 g/dL
        .340


 Conclusión

Dados los resultados obtenidos pude comprobar que los valores de las muestras están dentro del rango normal de la hemoglobina.

Ademas a través de esta practica se pudo saber los cálculos correctos para la determinación de la hemoglobina.

TÉCNICAS MACROSCÓPICAS COPROPARASITOSCOPICAS

Técnicas Macroscopicas Coproparasitoscopicas

Tamizado

Se fundamenta en el fenómeno de la filtración, utilizando tamices de diferentes diámetros en donde quedan atrapados los parásitos ( trematodos, cestodos, nematodos). Esta técnica permite observar directamente las características morfológicas de los parásitos adultos, enteros o fraccionados de los metazoarios.   

Material:

1 coladera

1 abatelenguas

1 caja petri

1 pinza

Procedimiento:

1.- Colocar pequeñas porciones de materia fecal en la coladera con ayuda del abatelenguas.

2.- Dispersar la muestra con el abatelenguas y agregarle agua hasta lograr un tamizado lo mas limpio posible.

3.- Revisar cuidadosamente las partículas de las heces que hayan quedado en la coladera.

4.- Los parásitos encontrados colocarlos en una caja petri con solución salina.

5.- Se identifica la parte del parásito o el parásito completo 

6.- Se reporta el genero y la especie del parásito o parte del parásito.

Resultados

Macroscopicamente no se pudo observar ningún parásito a simple vista pero se observo microscopicamente algunos restos de almidón.

MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR FLOTACIÓN DE WILLIS

Método de concentración por flotación de Willis

 Introducción

Este método esta recomendado especialmente para la investigación de protozoarios y helmintos.consiste en preparar la materia fecal con solución saturada de cloruro de sodio.
Los huevos y quistes de peso especifico menos que la solución saturada de cloruro de sodio tienden a subir y adherirse a un cubreobjetos colocado en contacto con la superficie del liquido.

Material                                                            Reactivos      

• 1 Vaso de precipitados                          Solución saturada de NaCl
• 1 Embudo                                                Solución de Yodo- Lugol
• 1 Gasa 
• 1 Tubo de ensaye
• 1 Portaobjetos 
• 1 Cubreobjetos 

Procedimiento


1.- Tomar aproximadamente 1g de heces fecales con un abatelenguas 



2.- Colocar la muestra en un vaso de precipitados y mezclar con 10 ml de solución saturada de cloruro de sodio. 

3.- En un tubo de ensaye filtre la mezcla con una gasa llenando completamente el tubo.

4.- Coloque un cubreobjetos sobre el tubo, de manera que el liquido haga contacto con  el cubre objetos.


5.- Esperar de 5 a 10 minutos.

6.- Los quistes o huevos flotaran y quedaran adheridos a la cara del cubre objetos que esta en contacto con la muestra.

7.- Colocaran una gota de  yodo lugol sobre un portaobjetos, retirar el cubreobjeto con cuidado para evitar perdida del material y ponerlo sobre el portaobjetos. 

8.- Examinar la muestra al microscopio con el objetivo de 40x, buscando quistes o huevecillos de parasitos.














Resultados 

Al observar la muestras en el microscopio encontramos lo siguiente:

Huevesillos de Ascaris lumbricoides 

Muestra 1

Quistes de Entamoeba coli

Muestra 2

Huevesillos de Ascaris lumbricoides

Quistes de Entamoeba coli 

TÉCNICA DE FAUST-BISS

TÉCNICA DE FAUST- BISS

Este método se utiliza solución de Zn, cuya densidad específica es de 1.180 (33%), que conforma un medio de densidad más alta que la de los huevos: Necátor 1.055. Tricocéfalo 1.150. Áscaris fértil 1.110 y facilita que los huevos livianos de estos helmintos, con menor peso especifico que la solución, se concentren y floten.

La concentración adecuada aconsejada es la que usa como reactivo una solución acuosa de sulfato de Zn al 33% con una densidad al 1.180. El agua utilizada diluye y lava la metería fecal. El filtrado con gasa doblada evita que los detritos gruesos traspasen las paredes, la centrifugación enriquece en delgada película la superficie del líquido centrifugado con los huevos livianos de algunos helmintos.

Propósito:

Distinguir el método que se siga atreves de la técnica de faust para obtener resultados acerca del examen realizado.

Materiales:

• Toma de muestra biológica
• Embudo de decantación
• Vaso de precipitado
• Aplicador de madera
• Abate lenguas
• Tubo de ensayo
• Gasa
• Gradilla
• Mechero de Bunsen

Sustancias:

• Agua Destilada                                           
• Yodo Lugol
• Sulfato de Zn

 Procedimiento:

1. Mezclar bien una porción de materia fecal para preparar una superficie en 10 partes de agua destilada.

 Soluciones:

• Agua destilada
• Sulfato de Zn
• Yodo lugol

Procedimiento:

1. Mezclar bien una porción de materia fecal para preparar una superficie en 10 partes de agua destilada.

 2. Filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de centrífuga, ayudándose con un embudo pequeño.



3. Centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1min.




4. Decantar el liquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida anterior centrifugar nuevamente. Resuspender el sedimento.


5. repetir el procedimiento 2 veces hasta que el liquido sobrenadante este listo.
















6. Decantar nuevamente el liquido sobrenadante remplazándolo por igual cantidad de solución de sulfato de Zn al 33%. Mezclar bien la solución con el sedimento . centrifugar  durante 1 min a 1500 rpm.

7. Tomar 3-4 gotas de las partículas que flotan en la superficie del liquido . Colocarlos en un porta objeto y mezclarla con 1-2 gotas de Lugol, colocar cubre- objetos.

8. Examinar al microscopio y reportar los resultados.

  Conclusiones:

Pude desarrollar  el método de Faust además de identificar los diferentes resultados que encontramos en la muestra. 

Resultados:

En la muestra de heces fecales encontramos lo siguiente:

• cristales 
• quistes 
• grasa 
• jabones 
• tejidos conectivos 
• celula de almidón